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2024-3-14

一、精選內毒素更低批次細胞對內毒素非常敏感，過高的內毒素可誘導細胞釋放炎癥因子、引導細胞衰老或凋亡。不僅如此，胎牛血清會經常或長時間作用于細胞，一旦內毒素含量過高，細胞相當于長期在“有在毒培養基”中生長，被內毒素影響，細胞將處于“亞健康狀態”，進而影響實驗結果的穩定與準確性。因此，為保證細胞的健康，在培養細胞時，應該選用內毒素含量盡可能低的血清，以保障實驗的順利進行。Ausbian®進口特級胎牛血清，選擇內毒素含量≤3EU/ml，澳洲進口血源，曾經是細胞典藏等重大項目...

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經過CRISPR/Cas9基因編輯的細胞在培養過程中的特別注意事項 CRISPR/Cas9系統作為一種革命性的基因編輯技術，以其高效、簡便和準確性在遺傳學、生物醫學和生物技術領域獲得了廣泛應用。然而，在利用CRISPR/Cas9進行基因編輯后，細胞在培養過程中需要特別注意一些關鍵方面，以確保實驗的順利進行和結果的可靠性。以下是一些特別需要注意的事項。1.轉染后的細胞狀態監測首先，CRISPR/Cas9系統通過轉染將Cas9蛋白和sgRNA導入細胞，這一過程可能會對細胞造成一定程度的應激反應。因此，轉染后應密切監測細胞的生長狀態、形態和活力。如... 查看詳情 2024-07-20
DdmE作為DNA引導的原核生物Argonaute的研究近年來，隨著生物技術的飛速發展，科學家們在基因編輯和防御系統領域取得了諸多突破性進展。哥倫比亞大學的研究人員利用低溫電子顯微鏡（cryo-EM）深入研究了霍亂弧菌中的DdmDE防御系統，揭示了其質粒消除的分子機制。這一發現不僅為理解原核生物如何抵御外來遺傳元件提供了新視角，也為未來基因工程工具的開發奠定了基礎。分子生物學需要嚴格控制實驗室中的衛生，避免發生核酸污染，德國MB公司生產的PCRClean噴霧試劑，高效清除核酸污染。DdmDE系統概述DdmDE系統是病原體中一種重要... 查看詳情 2024-07-20
DdmDE系統的結構基礎是什么？基因編輯技術是十分重要的分子生物學實驗，需要對實驗環境進行嚴格的的控制，防治雜質核酸污染。德國MB公司生產的PCRClean，即用型噴霧試劑，可以清除實驗環境中的核酸污染。DdmDE系統的結構基礎是理解其質粒消除機制的關鍵。根據當前的研究，DdmDE系統的結構基礎可以詳細描述如下：一、系統組成DdmDE系統由兩個主要組件組成：DdmD和DdmE。DdmD：一種解旋酶-核酸酶融合蛋白，具有降解質粒DNA的能力。DdmE：一種DNA引導的原核生物Argonaute（pAgo）蛋白... 查看詳情 2024-07-20
為什么PCR跑出來的結果總是不好？聚合酶鏈式反應（PolymeraseChainReaction,PCR）作為分子生物學領域的核心技術之一，廣泛應用于基因擴增、基因診斷、遺傳分析等多個方面。然而，在實際操作中，許多科研人員常常會遇到PCR結果不滿意的情況，如擴增效率低、非特異性擴增、無擴增產物等。本文將深入探討導致PCR結果不滿意的幾大主要原因，并提供相應的解決方案。一、引物設計問題原因分析：引物特異性差：引物與目標序列的匹配度不高，可能導致非特異性擴增或擴增效率低下。引物濃度不適宜：過高或過低的引物濃度都會... 查看詳情 2024-07-20
常見的PCR實驗問題匯總跑PCR結果總不滿意的原因是多方面的，涉及引物設計、模板DNA質量、PCR反應條件、實驗室操作以及儀器狀態等多個環節。以下是一些常見的PCR結果不滿意狀況及其原因分析：一、PCR結果不滿意的常見狀況無擴增產物o原因分析：引物設計不當（如特異性差、引物間存在互補性）、模板DNA質量差（如降解、污染）、PCR反應條件設置錯誤（如退火溫度不合適、循環次數不足）、酶失活或未加入酶等。非特異性擴增o原因分析：引物特異性不強、退火溫度過低、模板DNA中存在抑制物或污染、鎂離子濃度過高等。... 查看詳情 2024-07-18
PCR擴增曲線異常——斜直線型擴增曲線現象描述：在進行PCR擴增時，發現部分樣本的擴增曲線呈現斜直線型，而非正常的平滑S型曲線。這種異常曲線表明PCR反應可能存在問題，導致擴增效率不穩定或擴增產物非特異性。原因分析：管蓋未蓋緊：由于每天處理的標本量較大，操作人員在加樣后可能未將PCR管蓋緊，導致在擴增過程中反應液蒸發，管內體積減少。這不僅改變了讀取熒光的標準，還可能導致探針濃度增加，進而形成斜直線型擴增曲線。耗材問題：使用的PCR反應管或封膜質量不佳，也可能導致反應液蒸發或熒光信號采集異常。例如，反應管氣密性差、... 查看詳情 2024-07-18

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