多能干細胞是個體發育的基礎，也是再生醫學的重要種子細胞之一。由于發育地位特殊，多能干細胞基因組具高度穩態（如小鼠胚胎干細胞的基因組變異率僅為胚胎成纖維細胞的1/100）。盡管多能干細胞較分化細胞具更強的基因組穩態維持能力，大量擴增培養、持續的DNA復制及特殊的細胞周期往往導致基因組變異，破壞其分化潛能，并產生致瘤風險，成為多能干細胞走向臨床應用的首要障礙。研究多能干細胞維持基因組穩態的特殊機制，有助于解決應用中大量擴增培養產生的基因組變異難題，并能為體內胚胎發育失敗或缺陷研究提供新思路。

中國科學院昆明動物研究所研究員鄭萍課題組長期研究多能干細胞基因組穩態特征和*調控機制。在前期工作中，鑒定了多能干細胞基因組穩態特異關鍵調控蛋白因子Filia和Floped，并闡述了其作用機制及體內重要生理功能（Cell Stem Cell 2015，16(6)：684-698；Cell Research 2018，28(1)：69-89；PLoS Biology 2019，17(10)：e3000468；Science Advances 2020，6：eaba0682）。

長鏈非編碼RNA（long noncoding RNA， lncRNA）能通過相變，和蛋白因子形成condensates，有效增強蛋白因子濃度，從而顯著提高工作效率。研究人員推測，多能干細胞很可能存在一些特異表達的lncRNAs，在其高效調控基因組穩態中起重要作用。為此，該研究對小鼠胚胎干細胞進行不同種類的DNA損傷處理，結合RNA-seq分析，篩選到了10多個表達響應損傷處理的干細胞特異lncRNA。針對其中1個尚未注釋、表達變化最為顯著且具物種保守性的lncRNA（命名為Discn，DNA damage-induced stem cell specific noncoding RNA）進行了深入的功能和機制分析。發現Discn對維持多能干細胞基因組穩定性至關重要，并揭示了其作用機制。Discn定位于核仁，和核仁蛋白NCL結合，阻止NCL在DNA損傷情況下遷移到核質和RPA形成蛋白復合體，從而增強自由RPA含量。自由存在的RPA是DNA代謝（復制、修復和重組）的關鍵調控因子。因此，Discn-NCL-RPA軸能高效調控DNA復制和修復。Discn也廣泛表達于神經干細胞、精原干細胞等成體干細胞中，提示其有重要生理功能。研究人員還構建了Discn基因敲除小鼠，發現Discn基因敲除可導致新生致死及神經發育異常，這些表型主要是由體內DNA損傷產生的嚴重炎癥反應引起。該研究揭示了多能干細胞中lncRNA介導的基因組穩態調控新機制，研究結果以A novel lncRNA Discn fine-tunes replication protein A (RPA) availability to promote genomic stability為題，于近日發表在Nature Communications上。

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來源：生物谷

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