細胞傳代培養原理

細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養）。

傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。

細胞傳代培養具體操作

1、材料和試劑的準備

1）細胞：貼壁細胞株

2）試劑：0.25％胰酶、1640培養基（含10％小牛血清）

3）儀器和器材：倒置顯微鏡，培養箱、培養瓶、吸管、廢液缸等

2、操作步驟

1）將長滿細胞的培養瓶中原來的培養液棄去。

2)加入0.5—1ml 0.25％胰酶溶液，使瓶底細胞都浸入溶液中。

3)瓶口塞好橡皮塞，放在倒置鏡下觀察細胞。隨著時間的推移，原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時將胰酶棄去，加入10ml培養液終止消化。

觀察消化也可以用肉眼，當見到瓶底發白并出現細針孔空隙時終止消化。一般室溫消化時間約為1—3分鐘。

4)用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液，分到另外兩到三瓶中，實踐培養液塞好橡皮塞，置37℃下繼續培養。第二天觀察貼壁生長情況。

科研實驗中，細胞的體外培養一直是一個重要環節。細胞要養好，就要用好血清，如Ausbian®特級胎牛血清，它適合各種細胞培養，尤其適合難養細胞，如：干細胞、肝細胞，神經細胞，原代培養、細胞融合、轉染細胞等。

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