大腸桿菌顯色培養基的原理

　　結合了顯色原和熒光基團，檢測β-葡萄糖醛酸酶的存在

　　大腸桿菌-藍至綠色，陽性β-葡萄糖醛酸酶和陽性熒光

　　其他大腸菌群-無色，陰性β-葡萄糖醛酸酶和陰性熒光

　　膽鹽混合物增加選擇性-革蘭氏陽性菌被抑制

　　操作步驟：

　　1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液

　　2、取樣品液1ml加入冷卻至45-50℃顯色培養基中混勻或涂布于平板上

　　3、36±1℃培養18～24h，選用有30～200個菌落的平板，計數平板上出現的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍綠色，其它細菌為無色或黃色菌落。

　　總大腸桿菌=藍綠色菌落

　　4、對可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營養瓊脂平板上，36±1℃培養12-16小時，挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗

　　大腸桿菌顯色培養基操作注意事項

　　1、切片脫蠟應盡量干凈。

　　2、組織固定起著非常重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時間。

　　3、經典三色染色中，常要求使用試劑（A）染核，也可用蘇木精染核，但蘇木精染核后切片顏色不夠鮮艷，因為染色目的主要在于區分膠原纖維和肌纖維，一般也可以省略該染色步驟。

　　4、試劑（B）的分化時間應該依據切片厚薄、組織的類別和新舊而定，。

　　5、試劑（E）為0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清晰鮮艷，如果使用量大可自行配制。

　　6、用試劑（F）分化要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色；纖維呈紅色即可。分化時間根據染色深淺而定，一般1～2min。

　　7、返藍液常使用氨水水溶液，亦可自行配制Scoot促藍液或0.1～1%碳酸鋰水溶液，該產品森貝伽有售。

　　8、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

　　9、使用場所應通風，并遠離火源。

　　以上便是今天關于大腸桿菌顯色培養基在實驗過程中要怎么操作及注意些什么的全部分享了，希望對大家今后使用本設備能有幫助。