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大腸桿菌O157:H7顯色培養基(CT-SMAC 平板)(國標)

更新時間:2020-02-18  |  點擊率:2322

 

貨號

品名

規格

儲存條件

保質期

M1340

HiCrome™ MacConkey Sorbitol Agar Base

100g(2L)

500g(10L)

2-8℃

詳見包裝品

FD147-5VL

Tellurite - Cefixime Supplement

5管(2.5L)

 

詳見包裝品

 

原理                                        

麥康凱山梨醇瓊脂培養基 是根據Rappaport和Henigh的文獻描述而制備的(1)。培養基中含有山梨醇和BC指示劑,不含乳糖。用于鑒別大腸桿菌O157:H7腸道病原菌。

大多數大腸菌群菌株 會發酵山梨醇,產生酸。當pH值低于6.8時,培養基中的中性紅會變成粉紅色。同時普通大腸桿菌具有ß-D葡萄糖醛酸酶,當遇到培養基中BC指示劑時,會呈現藍綠色。當兩種顏色疊加時,普通大腸桿菌在此種培養基中,終會呈現藍紫色。

大腸桿菌O157:H7不發酵山梨醇(2),也不具備ß-D葡萄糖醛酸酶活性(3),因而在此種培養基中產生的菌落為無色。

March和Ratnam報告(2),山梨醇麥康凱瓊脂培養基對大腸桿菌O157:H7的檢測具有100%的敏感性和85%的特異性,該培養基可作為篩選大腸桿菌O157:H7的可靠手段。

 

此培養基中:碳源、氮源及其它必要的生長營養素,由酪蛋白酶解產物和?蛋白胨提供;結晶紫和膽鹽會抑制大多數革蘭氏陽性菌生長;培養基中的氯化鈉維持滲透壓平衡。

 

如果需要,此培養基還可添加 碲酸鹽頭孢克肟添加劑(FD147),可使培養基更具有選擇性(4)。亞碲酸鉀可使大腸桿菌O157選擇性生長,并抑制嗜水氣單胞菌和普羅維登菌的生長;頭孢克肟可抑制變形桿菌。

 

注:假單胞菌在此培養基中也可產生無色菌落。若需對可疑菌落辨別,可進行氧化酶試驗,在5-10秒內觀察結果。

 

應用                                                              

HiCrome™麥康凱山梨醇瓊脂培養基 推薦用于從食物和動物飼料中選擇性分離大腸桿菌O157:H7。

 

培養基成分                                                         

 

成分                                 克/升

酪蛋白酶水解物               17

?蛋白胨                           3

山梨醇                             10

膽鹽混合物                       1.5

氯化鈉                              5

結晶紫                             0.01

中性紅                             0.03

BC指示劑 ,                        01

瓊脂                                13.5

終pH(25℃)              7.1±0.2

 

配制                                              

在495ml蒸餾水中溶解25.06克,加熱至沸騰以*溶解。15磅滅菌(121°C)15分鐘。冷卻到45°C。混勻,倒入無菌培養皿。

如果需要添加液態碲酸鹽頭孢克肟添加劑(FD147),在無菌培養基冷卻前添加。

 

質量控制                                                            

● 外觀——淺黃色至粉紅色,單一自由流動粉末

● 成膠性——牢固,可與1.35%瓊脂凝膠相媲美

● 制備好的培養基的顏色和透明度——在培養皿中為紫紅色、澄清并稍不 透明的凝膠形式

● 配比濃度——5.01%w/v(5.01g/100ml水)水溶液在25°C下pH為7.1±0.2

● pH值——6.90-7.30

 

培養結果                                                          

5-37°C孵育18-24小時后觀察培養特征(如有必要,可延至48小時)。

 

參考文獻                                                          

1.Hansen W. and Yourassawsky E., (1984), J. Clin. Microbiol., 20:1177.

2.Karmali M.A., Petric M., Lim C., et al, (1985), J. Infect. Dis., 151-775.

3.Thompson et al. (1990). J. Clin. Microbiol. 29, 2165-2168.

4.Zadik P.M., Chapman P.A. and Siddons C.A., (1993), J. Med. Microbiol., 39, 155-158.

 

 

產品引用文獻

1. Sreepriya Prakasan, Parmanand Prabhakar, Manjusha Lekshmi, Sanath Kumar,Binaya Bhusan Nayak.Isolation of Shiga toxin-producing Escherichia coli harboring variant Shiga toxin genes from seafood.Vet World. 2018 Mar; 11(3): 379–385.

2. SK Manna, C Manna,et al.Serogroup distribution and virulence characteristics of sorbitol-negative Escherichia coli from food and cattle stool.Journal of Applied Microbiology, 2010, 108 (2) :658–665

3. KM Mbae,MK Ndwiga,FG Kiruki.Microbiological Quality of Kachumbari , a Raw Vegetable Salad Popularly Served Alongside Roast Meat in Kenya.Journal of Food Quality,2018,(35):1-7

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