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無血清培養基的發展歷程

更新時間:2019-03-05  |  點擊率:1887

在細胞培養中大多數動物細胞體外培養時都需要加入血清提供營養,但由于血清存在很多潛在風險,促使科學家們進行無血清馴化細胞的研究。20 世紀 50 年代后期,研究者發現添加少量血清就能滿足細胞培養的基本營養需求,隨后科學家們開始用一些營養因子代替血清中某些已知成分用于細胞培養。

 

Hayashi 等在1976 年提出了無血清培養基的概念,此后,大量生物醫藥學家開始對無血清培養基進行研制。80 年代后,無血清培養基的研究與制備廣泛發展,到 90 年代已有一些商業化無血清培養基。相關法律法規對血清的研發及使用提出了限制。2000 年版《中國生物制品主要原輔料質控標準》中就對血清的質量有了較為嚴格的要求,而后國家藥品監督管理局在2003 年專門頒布了與血清相關的《細胞培養用牛血清生產和質量控制技術指導原則》用于規范細胞培養用牛血清的生產、質量控制,促進牛血清質量的提高。

 

從上看,2010 年,美國和歐盟等國家已停止在生物制藥中使用血清,美國食品藥品監督管理局(FDA)也停止了對含有血清的細胞培養技術及新藥的受理。各國對添加血清

培養液生產出的疫苗逐年進行控制,使無血清培養細胞包括生產疫苗和生物藥物等技術成為發展趨勢。

 

實踐已證明無血清培養基不僅能在很大程度上避免或改善含血清培養基所帶來的缺陷,也能取得較好的培養效果。并且由于其明確的成分組成,可避免血清的不同批次或不明組分對細胞培養及試驗研究的影響,從而提高結果的可重復性。由于這些優點,無血清細胞培養技術的研究日益得到人們的重視。


 

無血清培養基是在合成培養基的基礎上發展起來,旨在尋求血清的替代成分,使其既能滿足細胞培養的要求又能避免血清所帶來的不利影響。

 

例如,由生物公司HiMedia公司生產的SFRE199-1和SFRE199-2。SFRE Medium 199系列是對基礎培養基M199培養基的改良,起初用于原代狒狒腎(Bak)細胞的生長和維持。培養基在M199培養基基礎上添加了丙酮酸鈉、硫酸鋅,并提高了精氨酸-鹽酸、半胱氨酸、胱氨酸、L -谷氨酰胺、L -谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、酪氨酸和葡萄糖的濃度,使其實現大的無毒活性。SFRE 199 -2還添加了半乳糖,以避免乳酸過度積累,并使pH值在細胞延長的維持期內,保持在生理范圍。AT089是SFRE 199-1培養基,含有Hank鹽;AT090是SFRE 199-2培養基,含有Earle's鹽,均不含胰島素,因此在使用前必須單獨添加。有報道,SFRE199系列培養基,可用于Vero細胞無血清培養。

 

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細胞培養、微生物培養和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。

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